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作育基
产品说明
肠癌条件重编程作育基是一种为增进人源肠癌原代细胞体外生长而开发的作育基。它是一种无菌的液体混淆系统，含有必需和非必需的氨基酸、、维生素、、有机和无机化合物、、激素、、生长因子、、微量矿物质和一定量的血清。作育基基于碳酸氢盐的缓冲系统，在5% 、、37℃作育箱中平衡时，pH值为7.4。该作育基的配方可以提供合适的人源肠癌原代细胞体外作育情形，选择性地增进体外人源肠癌原代细胞的生长。
使用说明
1. 肠癌原代细胞作育
获取的人源肠癌原代细胞，凭听说明书表1中细胞数接种在合适的作育器皿中，加入γ射线辐照后的NIH-3T3细胞(γ-NIH-3T3作为滋养层细胞，添加滋养细胞数目详见说明书)，原代细胞首次接种后2-3 天勿动(利于细胞贴壁)，作育历程中若作育基颜色变黄但细胞未长满时可举行半换液，镜下视察细胞未长满但γ-NIH-3T3细胞已缺乏时，适量增补γ-NIH-3T3细胞(一般补加初始数目的一半)。
2. 肠癌原代细胞传代
镜下视察细胞形成克隆，且汇合度85~95%时即可传代；作育箱中取出细胞，弃旧作育液，0.05%胰酶洗涤5秒后吸尽，再加入适量0.05%胰酶，37℃孵育，2~5 min后拿出轻拍作育瓶/板侧面，显微镜下视察细胞消化情形；细胞消化至细胞变圆并最先脱落时用原代细胞终止作育基终止消化，并将细胞转移至离心管中，1500 rpm，3 min；弃上清，以1~5 mL相对应的原代细胞作育基重悬细胞，活细胞计数，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于作育瓶/板，加入γ-NIH-3T3细胞(差别规格作育瓶/板底面积、、接种原代细胞数目、、添加滋养细胞数目详见说明书)，补加肠癌作育基至所需体积，十字交织混匀，作育容器75%外貌消毒后置作育箱，37 ℃ 、、5 % CO2条件作育。其他方法同上。
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