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作育基
产品说明
食管癌条件重编程作育基是一种为增进食管鳞癌原代细胞体外生长而设计的作育基。它是一种无菌的液体混淆系统，，含有必需和非必需的氨基酸、、、维生素、、、有机和无机化合物、、、激素、、、生长因子、、、微量矿物质等。该作育基产品基于碳酸氢盐的缓冲系统，，在5% CO2/95%空气的作育箱中平衡时，，pH值为7.4。该作育基的配方可以提供一个合适的平衡营养情形，，选择性地增进体外人食管鳞癌原代细胞的生长。
使用说明
4℃避光生涯3个月内有用。
1. 食管癌原代细胞作育
首次疏散的食管癌小样本细胞悬液一般无需计数，，直接种入12孔板中;食管癌术中样本过70微米筛网后计数，，凭听说明书表1中细胞数接种在合适的作育器皿中，，加入γ射线辐照后的NIH-3T3细胞(添加滋养细胞数目见说明书如表1和表2所示)，，原代细胞首次接种后2-3 天勿动(利于细胞贴壁)，，作育历程中若作育基颜色变黄但细胞未长满时可换半液，，镜下视察细胞未长满但NIH-3T3细胞已缺乏时，，适量增补γ射线辐照后的NIH-3T3细胞(一般补加初始数目的一半)。
2. 食管癌原代细胞传代
镜下视察细胞形成克隆，，且汇合度80~90%时即可传代；；；作育箱中取出细胞，，弃旧作育液，，0.25%胰酶洗涤30秒后吸尽，，再加入适量0.05%胰酶，，37℃孵育，，5 min后拿出轻拍作育瓶/板侧面，，显微镜下视察细胞消化情形；；；细胞消化至细胞变圆并最先脱落时用终止作育基终止消化，，并将细胞转移至离心管中，，1500 rpm离心3 min；；；弃上清，，以1-2 mL相对应的原代细胞作育基重悬细胞，，活细胞计数，，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于作育瓶/板，，加入γ射线辐照后的NIH-3T3细胞(差别规格作育瓶/板底面积、、、接种原代细胞数目、、、添加滋养细胞数目见说明书表1所示)，，补加原代细胞作育基至所需体积，，轻轻摇晃混匀，，外貌消毒后置作育箱，，37 ℃ 、、、5 % CO2条件作育。其他方法同上。
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